产品货号：
KL00220
中文名称：
通用型LAMP试剂盒(电泳法)
英文名称：
Universal LAMP kit
产品规格：
50T
发货周期：
1～3天
产品价格：
询价
本试剂盒含有LAMP扩增所需的所有成分，可以用于LAMP等温扩增。
LAMP即逆转录-环介导等温扩增，它利用4条模板专一的特异引物、逆转录酶和具有链置换能力的Bst DNA聚合酶2.0(8U/μL)，在等温条件下(65℃左右) 30～60分钟完成逆转录和LAMP扩增。该技术在灵敏度、特异性和检测范围等指标上能媲美甚至优于定性PCR技术，同时还不需要昂贵的仪器设备。目前已成功应用于生物的快速检测，广泛用于各个领域。
保存：-20℃，有效期1年。
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LAMP即逆转录-环介导等温扩增，它利用4条模板专一的特异引物、逆转录酶和具有链置换能力的Bst DNA聚合酶2.0(8U/μL)，在等温条件下(65℃左右) 30～60分钟完成逆转录和LAMP扩增。该技术在灵敏度、特异性和检测范围等指标上能媲美甚至优于定性PCR技术，同时还不需要昂贵的仪器设备。目前已成功应用于生物的快速检测，广泛用于各个领域。
- 即开即用，含有红色电泳示踪剂，扩增后可以直接上样，不需要上样液。
- 4倍浓度，提供更多的加样品的空间，可以增加检测机率。
- 高特异性，精心优化的配方，非特异扩增比自配的试剂更低。
- 高扩增效率，一般比PCR灵敏一个数量级。
- 65℃左右等温扩增，不需要贵重仪器。
- 本试剂盒足够50次20μL体系的LAMP扩增。
- 提供扩增对照，便于在遇到困难时分析原因。
- 本制品只能用于科研，不能用于临床。
| 组分 | 规格 |
| 4×LAMP MasterMix(含电泳示踪剂) | 200μL |
| Bst DNA聚合酶2.0(8U/μL) | 50μL |
| 阳性对照模板-引物混合物 | 50μL |
保存：-20℃，有效期1年。
- 制备模板DNA：用于选用合适的方法制备模板DNA。如果有N个样品，最好设置N+2个样品制备，多出的两个一个是样品制备阳性对照，一个是样品制备阴性对照。
- 配制5×LAMP引物混合液
先加超纯水将合成的HPLC级别的下列引物干粉稀释到下表所标注的母液浓度，然后在一新的离心管中按表中所列体积加入各种引物母液和超纯水，最后得到1mL的5×LAMP引物混合液，此混合液足够250次20μL体系的LAMP扩增。如果需要配制的5×LAMP引物混合液体积异于1mL，则各成分的用量请按比例调整。引物混合液可以在-20℃放置2年。
注：如果没有Loop引物，则用超纯水补足其体积。引物名称 母液浓度 加母液量 在5×LAMP引物混合液中的浓度 FIP引物 100μM 80μL 8μM BIP引物 100μM 80μL 8μM F3引物 100μM 10μL 1μM B3引物 100μM 10μL 1μM Loop F 100μM 20μL 2μM Loop B 100μM 20μL 2μM 超纯水 780μL 终体积 1mL - 在冰上融化4×LAMP MasterMix(含电泳示踪剂)，混匀，稍离心。第一次使用时，请将50μL Bst DNA聚合酶2.0(8U/μL)全部加入到4×LAMP MasterMix中并轻柔混匀至少1分钟，然后再使用。如果有N个样品，则在N+2个反应管中加入以下组份，多出的一管是LAMP扩增阳性对照（PC），一管是LAMP扩增阴性对照（NC）：
成分 N+2个样品管 LAMP扩增PC LAMP扩增NC 4×LAMP MasterMix(已加酶) 5μL 5μL 5μL 自备的5×LAMP引物混合液 4μL 不加 4μL 阳性对照模板-引物混合物 不加 4μL 不加 自备模板DNA 1～9μL 不加 不加 自备超纯水 至20μL 至20μL 至20μL - 混匀，置于65℃保温60分钟。如果是在PCR仪中保温，必须加热盖。如果用金属浴或水浴保温，没有热盖，必须覆盖50μL的自备石蜡油，否则保温期间反应体系的水分会蒸发，会严重影响反应效率。
- 扩增结束后取5～10μL扩增产物直接上样（本制品含有红色电泳示踪剂，不需要再加上样液，红色示踪剂的泳动速度相当于50bp的DNA）进行2～3%的琼脂糖凝胶电泳，有LAMP扩增的样品将可见LAMP特征性DNA梯度电泳图谱（见下图）：
- 结果分析：如果本试剂盒提供的阳性对照-引物混合物能够扩增而阴性对照不能扩出，则实验有效。如果阳性对照-引物混合物没有扩增出条带，则试剂盒的问题，请与我司联系。如果阴性对照（水作为模板）有扩增出条带，则说明LAMP样品或试剂有过去的扩增产物的污染，需要注意操作的规范性，如果不能解决，可以重新设计LAMP引物扩增新的靶片段。
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